High-performance liquid chromatography
Cromatografia Líquida de Alta Eficiência' (CLAE, em inglês: High Performance/Pressure Liquide Chromatography, HPLC) é uma técnica cromatográfica. Se distingue por usar a fase móvel à alta pressão (daí o "pressure" da sigla em inglês).
O uso de pressões elevadas permite uma redução no diâmetro das
partículas da fase estacionária, localizada no interior da coluna
cromatográfica. O uso de partículas
menores (na ordem de 5,0 µm) no recheio da coluna resulta em uma área
superficial, o sítio de adsorção, maior (geralmente da ordem de centenas
de metros quadrados por grama de fase estacionária), o que promove uma
separação mais eficiente dos componentes da amostra. Essa
"miniaturização" das partículas da coluna permite o uso de colunas
menores, volumes
menores de amostras e um gasto menor de fase móvel. Assim sendo, em
cromatografia líquida de alta eficiência trabalha-se na faixa dos
microlitros (µL).
O advento dessa técnica analítica só foi possível graças à produção
de cromatógrafos líquidos totalmente automatizados (embora mesmo hoje
ainda exista cromatógrafos que não oferecem opção de injeção automática
de amostragem). Nesses cromatógrafos as bombas de fase móvel permitem o
trabalho geralmente na faixa média de 2.500 psi. Hoje em dia são
oferecidos, também as máquinas da chamada CLUE - Cromatografia Líquida
de Ultra Eficiência (Em inglês, UPLC), que trabalham com partículas de
colunas ainda menores (até 0,01 µm) e pressões ultra-elevadas (da ordem
de 15.000 psi).
Baixe aqui o manual de Conceitos HPLC:
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